猫疱疹病毒用什么染色？
荧光定量PCR方法检测鼻咽部分泌物中疱疹病毒的负荷量，该方法具有快速、敏感、特异等特点，可准确地判断猫疱疹病毒感染的状况，为临床治疗提供依据。 取鼻分泌物做实时荧光定量 PCR 分析。 以鼻分泌物中疱疹病毒 DNA 为对象，采用实时荧光定量 PCR 法进行病毒负荷量的测定（以拷贝/ml 表示）。 病毒基因组拷贝数的计算见参考文献［14］。 采用 SPSS 软件的 One-way ANOVA 方差分析进行统计分析，P<0.05 为差异有统计学意义。
结果 9 只感染猫的病毒负荷量均值为(3.452±0.830)×106 拷贝/ml； 5 只未感染猫的病毒负荷量为 < 3 × 105拷贝/ml。两样本间比较，差别有高度统计学意义（F=27.456，P＜0.01）； 同一时间点，不同病毒载量组间比较差别也有统计学意义（F=3.983，P＜0.01）。
结论 实时荧光定量 PCR 法能灵敏地检测出猫鼻咽部分泌物中微量的 HSV-1 DNA，且操作简便，适合大量样品的检测。 用荧光定量 PCR 方法对实验组及对照组的猫进行了检测。结果如表 1 所示，所有感染的猫样品经提取后，均为阳性反应，即含有 HSV-1 的DNA 序列，病毒负荷量平均值为 (3.452 ± 0.830)x10^6 拷贝/μl。而所有的非感染样品均为阴性，说明该方法的敏感性可以满足检出要求。
另外，还观察了干扰素（IFN-γ）和白细胞介素（IL-4）在血清中的表达情况。结果如图 1 和图 2 所示。与 IFN-γ 在血清中的高表达相比，IL-4 的水平非常低。 值得注意的是，虽然在感染的猫体内可以检测到两种细胞因子的mRNA，但并不表明它们是由 Th1 或 Th2 细胞产生的，因为其他细胞也可能会产生这些细胞因子[16]。由于外周血中的单核细胞可能分化为 Th1 或者 Th2 细胞，因此不能排除单核细胞所产生的细胞因子混入血清的可能。但是，既然主要观察到的细胞因子是对抗 HPV 感染的干扰素，就可以推测它是由激活的巨噬细胞产生的。
总之，本研究证明用 RNA 提取试剂盒从猫的鼻腔冲洗液中可以得到高质量的 RNA，可用于后续基因芯片分析和 realtime qRT-PCR 检测。同时，使用 Real Time RT-PCR 方法能在猫感染 HPV 后的第 7 天检测到病毒 DNA 拷贝数，而在感染后第 14 天达到高峰。这一发现为临床上及时诊断 HPV 感染提供了理论依据。而且，在感染的早期阶段就观察到病毒和抑制因子的基因表达，这可能与病毒潜伏和在局部激发慢性炎症反应相关。